外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMC)是外周血中具有单个核的细胞的混合群体,可以进一步纯化分离出多个细胞类型,如自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)、T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞等。作为免疫系统的关键组成部分,在免疫学、传染病、恶性肿瘤、疫苗研发、移植治疗、个性化医学和毒理学等领域作为最基础的实验原料被广泛使用。
为缩短客户的研发周期,针对不同的研究方向与实验场景,赛笠大量筛选了不同批次PBMC分离服务的测试数据,可为客户提供适合不同实验的优选人源PBMC分离服务。
一、基于多个批次PBMC分离服务的ADCC实验
以SK-BR-3为靶细胞,直接使用分离的PBMC作为效应细胞进行的ADCC实验。通过检测乳酸脱氢酶(LDH)测定细胞杀伤效果。筛选实验中,多个批次的PBMC呈现较好的ADCC反应。
二、基于多个批次PBMC分离服务的ADCP实验
以Raji为靶细胞,M2为效应细胞进行的ADCP实验。通过流式测定,靶细胞和效应细胞双阳细胞群占比计算吞噬率。上述实验中。多个批次的PBMC呈现较好的ADCP反应。
三、基于多个批次PBMC分离服务的MLR实验
MLR实验中,研究者往往因为个体差异性的问题,导致实验结果不理想,研发周期长。赛笠基于MLR的实验特点,大量筛选了不同批次的PBMC,可根据研究者需求,推荐选择满足要求的服务批次,以减少样本个体化差异带来的实验影响,加速研发进程。
四、基于多个批次PBMC分离服务的T细胞增殖实验
赛笠生物采用PHA作为刺激剂,使用PBMC作为起始细胞,进行T细胞的增殖实验,持续进行12天的连续培养及细胞计数,以确定不同批次T细胞的激活扩增能力。
五、基于多个批次PBMC分离服务的TDCC实验
针对目前火热的多抗药物筛选,赛笠生物增加CD3&BCMA双抗介导的T细胞杀伤筛选实验,以NCI-H929作为靶细胞,不同批次PBMC分离的CD3+T细胞作为效应细胞,评价不同批次的T细胞杀伤效果。
六、基于多个批次PBMC分离服务在重度免疫缺陷小鼠上的重建筛选
采用不同分离批次的PBMC,针对不同的免疫缺陷小鼠品系(NOG、M-NSG、NCG)重建做了大量筛选。实验中对接种PBMC后的免疫缺陷小鼠进行流式(hCD45、hCD3、hCD4、hCD8、mCD45)、体重、GVHD等持续观测至第35日,为后续的donor挑选提供充足的数据支持。
下列示例分别为接种PBMC后的免疫缺陷小鼠体重及流式检测数据曲线:(以NOG为例)
流式检测数据(hCD45%)曲线:
七、基于PBMC的定制化筛选服务
针对不同实验需求,赛笠生物除上述常规筛选服务外,推出多种定制化筛选服务(以CRO的合作形式),如不同批次的PBMC中特殊亚型占比的流式检测,使用PBMC进行淋巴细胞扩增能力及扩增中的纯度检测,以及不同donor分离的PBMC在不同待测样品刺激下的因子分泌等,以匹配客户实验中PBMC的不同使用场景。